خلاصه

بیماری های عفونی سالانه باعث مرگ و میر و خسارات اقتصادی بی شماری در سراسر جهان می شود. در حالی که اقدامات درمانی موجود می تواند وضعیت را کاهش دهد، نارسایی های تشخیصی مانع از تشخیص زودهنگام موارد می شود. پیشرفت تکنولوژی، تشخیص هایی را به ارمغان آورد که عملکرد بالایی دارند، اما مبتنی بر آزمایشگاه هستند، به پرسنل ماهر، زمان بر و پرهزینه نیاز دارند. در مجموع، روستائیان که در آن بیماری‌های عفونی شیوع بالایی دارند، غیرقابل دسترسی هستند. تشخیص تاخیری باعث پیشرفت عفونت های خفیف و در نتیجه مرگ، ناتوانی و انتقال می شود. علاوه بر این، فقدان آزمایش‌های مؤثر از تشخیص زودهنگام انگل‌های مقاوم به دارو یا عفونت‌های پایدار منتسب به داروهای تقلبی جلوگیری می‌کند.
فناوری برای تبدیل سیستم ایمنی پیچیده به آزمایش‌های نقطه‌ای مراقبت (POC) به خوبی تثبیت شده است. این تست‌های POC آنتی‌ژن را از طریق آنتی‌بادی‌های مونوکلونال (MAbs) که روی یک تکیه‌گاه جامد یا آنتی‌بادی‌های میزبان ناشی از عفونت از طریق آنتی‌ژن تثبیت‌شده بی‌حرکت هستند، شناسایی می‌کنند. تشخیص آنتی ژن به طور قابل اعتماد عفونت مداوم را نشان می دهد بر خلاف تشخیص آنتی بادی که ویژگی های آن به دلیل تداوم آنتی بادی ها حتی پس از پاکسازی عفونت ها به خطر می افتد. در حالی که آزمایش‌های POC تشخیص آنتی‌ژن در محیط‌های روستایی کافی است، تلاش‌ها برای توسعه آن‌ها به دلیل ناتوانی MAbs آزمایش‌ها در رقابت با آنتی‌بادی‌های میزبان ناشی از عفونت که علیه همان اپی توپ‌های روی آنتی‌ژن هدایت می‌شوند و در نتیجه حساسیت را تحت تأثیر قرار می‌دهند، خنثی می‌شود. بخش متغیر نوترکیب یک آنتی بادی با زنجیره سنگین شتر (ر.ک. Nanobody) قادر به غلبه بر این چالش است. در واقع، نانوبادی ها (Nbs) دارای یک CDR3 مشخص هستند و در نتیجه به اپی توپ های مرموز غیرقابل دسترس توسط CDR های کوتاه آنتی بادی های معمولی می رسند و از رقابت فرار می کنند.
این مطالعه توسعه روش تشخیص آنتی ژن مبتنی بر Nb را برای تریپانوزومیازیس حیوانی آفریقایی (AAT)، که بر صنعت دامداری در روستاهای جنوب صحرای آفریقا تأثیر می‌گذارد، مورد بررسی قرار داد. به عنوان مقدماتی، یک مطالعه پایلوت پایلوت در یک منطقه بومی معمولی AAT (اوگاندا) انجام شد و در واقع، انگل‌های تریپانوزوم در میان سایر هموپارازیت‌ها شناسایی شدند. T. congolense که غالب‌ترین تریپانوزوم بیماری‌زا است به‌عنوان یک انگل مدل برای توسعه یک سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) با تشخیص آنتی‌ژن مبتنی بر Nb انتخاب شد که به دستگاه تست POC ترجمه می‌شود. بیومارکر هدف این ایمونواسی، آنزیم فروکتوز ۱،۶-بیس فسفات آلدولاز (آلدولاز) بود که در گلیکوزوم های تریپانوزوم ها یافت می شود. از آنجایی که هیچ استاندارد طلایی برای ارزیابی سنجش نهایی وجود ندارد، عملکرد مقایسه ای روش های PCR تو در تو و پان تریپانوزوم ۱۸S-PCR-RFLP برای این منظور انجام شد. با توجه به اینکه ITS PCR تودرتو می‌تواند عفونت‌های مختلط را بهتر از ۱۸S-PCR-RFLP تشخیص دهد، این باعث می‌شود تست قابل اعتمادتر باشد. بنابراین، هنگامی که ELISA مبتنی بر Nb به یک آزمایش POC آینده ترجمه شد، عملکرد آن باید در برابر ITS PCR تودرتو ارزیابی شود.